一、检测方法
A、用杯子或适当容器,装100ml纯净水(矿泉水或蒸馏水),再取约70只虾苗放入杯子或容器中,洗净;
B、依虾苗的大小(以虾苗大小与数量表格为准)取适量虾苗放入稀释液中,用研磨棒研磨至虾体粉碎(以看不到整块苗体为标准);
C、静置2分钟,取上清液0.1ml(用无菌吸管取上清液到刻度处),加入第二支稀释液中,摇匀,再取上清液0.1ml至TCBS培养基上;
D、用无菌涂菌棒将液体充分均匀的涂抹于TCBS培养基上;
E、将培养基放于30℃静置培养12~24小时后观察;
F、观察时清点培养基上菌落数量,并参照计数方法的采样数量,计算出虾苗弧菌数量
二、虾苗大小与数量
大小(cm)/数(只) 0.5=50 0.6=45 0.7=40 0.8=35 0.9=33 1.0=30
三、计数方法
弧菌数量计算方式(个/g) :培养基菌落数×2000
安全弧菌菌落数(个) :150 以下(黄菌150以下、绿菌25以下)
建议在育苗前应先检测水体的弧菌总数,总弧菌数不要超过1000菌落/克(CFU/g),低于100 CFU/g被认为是安全指标,而在接近1000 CFU/g时,则是危险指标。特别地,每克水体中副溶血弧菌的菌落不能超过30个,而哈维氏弧菌更不应该被检测到。
做弧菌培养前称取8.9gTCBS培养基,煮沸溶解于100ml 蒸馏水中, 冷至 60℃左右时, 倾入无菌培养皿 ,自然冷却即可得到一个弧菌培养皿。检测时用无菌巴氏滴管吸取一滴样品(约50微升),用无菌涂布棒涂布均匀,之后放入恒温箱,36 ℃±1 ℃,培养8 h~18 h。
(完)
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