好消息,非洲猪瘟现场快速检测试剂名单公布!大华农榜上有名!

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  养猪职业经理人,微信ID:YZZYJLR2016 资料来源:pig333

  据了解,按照农业农村部畜牧兽医局要求,中国动物疫病预防控制中心(农业农村部屠宰技术中心)(以下简称“中心”)于3月27日至5月 26日组织开展了第二次非洲猪瘟现场快速检测试剂评价工作,并对1月4日已公布的非洲猪瘟快检试剂进行了抽检。

  今天(6月11日),中心发布了通过专家评审的非洲猪瘟现场快速检测试剂名单,以便相关单位根据农业农村部有关检测工作要求选择使用。

  本次评价和抽检对各单位送检的试剂盒中试产品进行了实验室测评和专家评审,检测样品类型仅限于样品盘的类型,包括猪血液和猪组织样品。

  通过专家评审的非洲猪瘟现场快速检测试剂名单包括26个企业的34个产品,分为荧光定量PCR类和等温扩增类两大类型,详细名单如下:

  

  (以上由中国动物疫病预防控制中心、兽药规范使用综合整理)

  实时定量PCR检测方法的建立与应用

  陈海涛

  A,为何非瘟检测强调要以病原检测为主?

  

  源于《FAO动物生产与卫生手册——非洲猪瘟:发现与诊断》

  由上图可以看出,猪只感染初期直到死亡,主要以病毒血症为主,10天左右达到高峰,之后逐渐下降,而ASF抗体的产生只有极少数幸存者到12天才开始产生,因此检测非瘟最好的方法现场还是以检测ASF病毒为主。

  B,非瘟检测为什么选择qPCR为佳?

  

  * 上述数据为概略数据,根据检测对象及仪器试剂不同会有一定的不同

  从上表可以看出,qPCR灵敏度高,特异性强,对生物学样本有极强的分辨能力,国内基本能做到100-150个拷贝左右。

  胶体金方法灵敏度为10的5次方拷贝,因此使用前需验证,期待更快更灵敏的低成本方法。

  二、qPCR检测方法-专业或便携两种方式

  2.1. 专业qPCR方法建立——对场地、人员及经费要求更高

  

  组织研磨: 对组织样品较多的用户建议配置

  核酸提取:检测量大的用户建议配置,国产进口均可。

  荧光定量PCR仪器: 国产及进口一般均能使用,但某些情况需要慎重。

  需配置其它通用设备及专业技术人员,最好设专用实验场地

  专业PCR实验室场地有较高要求-建议参考ABSL2级

  

  ● 严格分区

  试剂准备间

  样品处理间

  扩增间

  ● 每个区域需设置缓冲间

  ● 严格控制空气单向流动

  ● 人员做到单向流动

  2. 2. 非瘟便携式PCR检测方法建立

  

  携带方便,价格便宜,适用于家庭农场、养殖小区集中批次检测;

  *需注意检测地点选择及生物安全。

  便携式核酸检测箱-配置需全面,核心设备需稳定,建议非贴牌

  

  软件操作简单-适合基层

  图形化操作

  运行中可添加循环数

  样品标记及荧光选择快捷方便

  样本用不同颜色标记

  可邮件发送实验报告

  

  

  

  

  可搭建监控网络-适合多点饲养,方便统一监管

  

  荧光定量试剂盒选择-按前文农业农村部要求,了解现有使用情况/方便性/通用性/价格等

  

  操作简单

  快速

  无需专门实验室

  结果更准确

  试剂开放

  3.1 qPCR检测样品相关问题:

  1全血样品的敏感性高出血清5倍左右。

  2粪便样品/口腔液样品采样方式及预处理方式需要专门处理。

  3良好的实验室操作规范及良好的采样方案非常重要。

  4 样品可以进行一定的混合,前提是良好的实验能力。

  3.2 发生非瘟猪场复产检测评估 (用于生物安全)

  

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